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免疫組化試劑盒是一種用于生物樣本分析的工具

更新時間:2025-10-07   點擊次數:128次
  免疫組化試劑盒是一種用于生物樣本分析的工具,常用于檢測特定抗原或蛋白質在組織或細胞中的分布和表達。通過使用這種試劑盒,可以在組織切片或細胞涂片中標記出目標分子,從而幫助科學家、醫生和研究人員了解疾病的機制、診斷病理、或研究特定生物標志物。
  基本原理:
  免疫組化技術通過抗原-抗體反應來進行檢測。該試劑盒通常包含抗體、顯色劑、抗原修復液、封閉液等。具體操作是將目標抗體(針對特定蛋白質或抗原)與樣本中的抗原結合,并通過某種顯色反應使目標位置顯現出來,最終通過顯微鏡觀察結果。
  常見應用:
  病理診斷:通過免疫組化分析,病理學家可以識別癌癥或其他疾病相關的生物標志物。
  細胞研究:檢測特定蛋白在細胞內的分布。
  臨床研究:幫助了解不同疾病狀態下的分子機制。
  免疫組化試劑盒的使用方法
  1.切片,烤片60℃1h。
  2.脫蠟及復水。
  3.PBS浸洗3次,每次3min。
  4.抗原修復。(一般來說,常見的修復方式有:EDTA、檸檬酸、蛋白酶K,可根據一抗進行選擇。)
  5.PBS浸洗3次,每次3min。
  6.30%H2O2(1000μlPBS+200μl30%H2O2)室溫避光孵育15min。
  7.PBS浸洗3次,每次3min。
  8.加適量山羊血清封閉15min,覆蓋住樣本即可。
  9.滴加一抗,4℃過夜孵育。
  10.PBS浸洗3次,每次3min。
  11.滴加抗小鼠生物素化二抗(使用濃度為1:100-1:300),37℃孵育1h。
  12.PBS浸洗3次,每次3min。
  13.滴加HRP標記鏈霉親和素三抗(使用濃度為1:100-1:300),室溫孵育30min。
  14.PBS浸洗3次,每次3min。
  15.DAB顯色5min。(900μlPBS+50μl20xDAB顯色液A+50μl20xDAB顯色液B)
  16.蒸餾水浸洗。
  17.蘇木素復染2-3min。
  18.用1%的鹽酸酒精分化數秒,自來水返藍。
  19.脫水透明。
  20.中性樹膠封片。